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　　以下是關(guān)于人促紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒的實驗使用說明：

　　BS-10009 人促紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　雙抗體夾心法?：采用包被抗人EPO抗體的微孔板捕獲樣本中的EPO，再通過酶標抗體形成復合物，經(jīng)顯色反應(yīng)測定濃度。

　　顯色機制?：底物TMB在過氧化物酶催化下顯藍色，終止后轉(zhuǎn)為黃色，OD值與EPO濃度成正比。

　　二、試劑盒組成

　　標準品?：需用蒸餾水稀釋至400mIU/mL，梯度稀釋后使用。

　　酶標試劑?：HRP標記的檢測抗體。

　　洗滌液/終止液?：濃縮洗滌液需20倍稀釋，終止液為硫酸溶液。

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：室溫靜置后離心取上清，避免反復凍融。

　　組織勻漿?：PBS沖洗后勻漿，離心取上清。

　　細胞培養(yǎng)上清?：直接離心后檢測。

　　四、操作步驟

　　加樣?：空白孔加稀釋液，標準孔和樣本孔各加100μL，37℃孵育2小時。

　　洗滌?：棄液體后加檢測抗體A/B工作液，分別孵育1小時，洗滌3-5次。

　　顯色?：加TMB底物避光反應(yīng)15-30分鐘，終止后450nm測OD值。

　　五、注意事項

　　預(yù)實驗?：建議使用前做預(yù)實驗以優(yōu)化條件。

　　時間控制?：加樣間隔不超過10分鐘，避免孵育時間差異。

　　保存?：試劑2-8℃保存，樣本-20℃以下凍存。

　　六、結(jié)果計算

　　以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制曲線，樣本濃度通過回歸方程計算。

　　如需更詳細的步驟圖示或特殊樣本處理方法，可參考試劑盒附帶的完整說明書。

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