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　　大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書通常包含以下關(guān)鍵內(nèi)容：

　　一、產(chǎn)品基本信息

　　?產(chǎn)品名稱?：大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

　　?用途?：僅用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。主要用于定量測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血纖蛋白原(Fbg)的含量。

　　?規(guī)格?：通常有48T/盒、96T/盒等規(guī)格可選。

　　?保存條件?：2~8℃避光防潮保存。

　　?有效期?：一般為6個(gè)月，具體以說明書為準(zhǔn)。

　　二、試劑盒組成

　　試劑盒通常包含以下組分(具體以實(shí)際產(chǎn)品為準(zhǔn))：

　　標(biāo)準(zhǔn)品

　　樣本稀釋液

　　酶標(biāo)包被板

　　酶標(biāo)工作液

　　顯色劑A液和B液

　　終止液

　　洗滌液(可能為濃縮液，需稀釋后使用)

　　封板膜

　　說明書

　　三、實(shí)驗(yàn)原理

　　本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被Fbg的透明酶標(biāo)包被板中，經(jīng)過溫育、洗滌、加酶標(biāo)工作液、再溫育、洗滌、顯色和終止等步驟后，通過測定450nm波長下的吸光值(OD值)來計(jì)算樣本中Fbg的含量。

　　四、實(shí)驗(yàn)步驟

　　?準(zhǔn)備?：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

　　?配液?：用蒸餾水將濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

　　?加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本?：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，加入相應(yīng)量的標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和樣本稀釋液。

　　?溫育?：在37℃水浴鍋或恒溫箱中溫育一定時(shí)間(如30分鐘)。

　　?洗板?：棄去液體，拍干，加入洗滌液靜置后棄去，重復(fù)洗板多次。

　　?加酶標(biāo)工作液?：每孔加入酶標(biāo)工作液，空白對照孔不加。

　　?再次溫育和洗板?：重復(fù)溫育和洗板步驟。

　　?顯色?：加入顯色劑A液和B液，避光顯色一定時(shí)間(如15分鐘)。

　　?終止?：加入終止液終止反應(yīng)。

　　?測定?：在終止后15分鐘內(nèi)測定各孔的OD值。

　　?計(jì)算?：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)樣本的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度。

　　五、注意事項(xiàng)

　　?樣本處理?：樣本不能含疊氮鈉(NaN3)，因?yàn)榀B氮鈉是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。

　　?實(shí)驗(yàn)條件?：實(shí)驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

　　?試劑保存?：未用完的試劑應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存，不同批號的試劑不得混用。

　　?操作細(xì)節(jié)?：加樣時(shí)應(yīng)避免交叉污染，每次加樣應(yīng)更換吸頭;底物B對光敏感，應(yīng)避免長時(shí)間暴露于光下。

　　請注意，不同品牌或批次的大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)步驟和試劑組成上可能有所差異，因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀并遵循具體產(chǎn)品的說明書進(jìn)行操作。