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酶聯(lián)免疫ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋操作流程
更新時(shí)間:2025-11-10瀏覽:23次

  酶聯(lián)免疫ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋操作流程

  ELISA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋操作流程 天津本生試劑盒


  一、標(biāo)準(zhǔn)品溶解

  離心處理?:將凍干標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心(6000-10000rpm,30秒),使管壁殘留粉末沉至管底?

  溶解操作?:按說明書加入指定體積的蒸餾水或樣本稀釋液,室溫靜置10-30分鐘溶解,避免立即吹打

  混勻要求?:溶解后渦旋振蕩或輕柔吹打混勻,形成原液(如S7濃度2000 pg/mL)?

  二、梯度稀釋方法

  準(zhǔn)備離心管?:標(biāo)記8個(gè)1.5mL離心管(S0-S7),S0管加入250μL樣本稀釋液作為空白對(duì)照?

  倍比稀釋步驟?:

  取250μL原液加入S6管,吹打混勻10次

  從S6管轉(zhuǎn)移250μL至S5管,同法操作至S1管

  最終濃度梯度:2000→1000→500→...→31.25 pg/mL?

  三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)

  稀釋液選擇?:血清/血漿樣本需使用試劑盒配套稀釋液,避免基質(zhì)干擾

  操作規(guī)范?:大比例稀釋(如200倍)建議分步進(jìn)行(先10倍再20倍)?

  現(xiàn)配現(xiàn)用?:生物素標(biāo)記抗體等試劑需在臨用10分鐘內(nèi)配制?

  四、常見問題處理

  標(biāo)準(zhǔn)曲線異常?:檢查稀釋過程是否混勻充分,避免氣泡殘留

  OD值超范圍?:確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品溶解,避免未溶解蛋白被槍頭帶走

  注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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